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可见分光光度计在使用过程中需要注意的一些问题

更新时间:2019-09-19      浏览次数:902
     如何选用适合自己的可见分光光度计?一般我们主要从光学构造、光谱范围、带宽、样品类型和分析工具这五个方面来考虑。下面就按这五个方面简单说明一下。
 
    分光光度计从结构上来区分一般可分为单光束和双光束分光光度计。何为单光束分光光度计,顾名思义,单光束分光光度计主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。 可见分光光度计一般是通过一个斩光轮将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品,可以小化光漂移和减少测量时间。但是其中一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以可见分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
 
    其次就是光谱范围。一般使用者考虑的是仪器需要比较大的灵活性,所以就得选择更高性能的宽光谱仪器,紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。这些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。
 
    可见分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。调整狭缝的宽度则可以选择投射出实验要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。 为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。光电倍增管可以提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商更依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。
 
    还有就是样品类型。在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管装样品容量一般从1μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了很强的环境适应性。
 
    后就是分析工具。大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。 另外一个值得考虑的因素是数据的终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果,也就有了不同的选择。所以这也是需要考虑的一点。
 
    下面要说的就是可见分光光度计在使用过程中需要注意的一些问题
 
    在可见分光光度计的使用过程中有这么几点是需要注意的:
 
    1)比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。其次,应保证每次测试时,比色皿架推拉到位。若不到位,将影响到测试值的重复性或准确度。后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命。
 
    2)干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致a)数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。b)反射镜发霉或沾污,影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因,分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。
 
    3)可见分光光度计的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。
 
    4)比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤,也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干,不要擦拭,以免损伤它的光学表面。
 
    5)为了防止光电管疲劳,不测定时将试样室盖打开,使光路切断,以延长光电管的使用寿命。
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